金标准主要分为两种，第一，梅毒螺旋体的直接显微镜检查，第二，血清中梅毒螺旋体的特异性抗体及非特异性抗体检测。

梅毒螺旋体直接镜检主要适用于一期梅毒感染阶段，这时候取病灶组织的分泌物，淋巴结穿刺液或者组织研磨液，在暗视野显微镜下观察发现了形体细长，两端尖直，暗视野下折光性较强的螺旋体，即为阳性，梅毒确诊。二期和三期梅毒阶段，需要用梅毒血清的抗体实验，包括特异性抗体TPPA,TPHA等，非特型抗体RPR,TRUST等。而在一期梅毒感染阶段，往往这些抗体还没有产生，所以这个阶段化验抗体往往阴性的。通过特异性抗体和非特异性抗体的结合，判断患者是否感染了梅毒，以及是否需要治疗。